与花青和罗丹明染料一样,荧光素也是一种有机染料。荧光素的比较大吸收波长为494nm,比较大发射波长为521nm(通常吸收蓝色范围内的光并发射绿色范围内的光),荧光素是一种高荧光物质。即使在非常少量的情况下也可以检测到它,并且在与抗体结合时用于显微镜检查。荧光素的衍生物包括异硫氰酸荧光素、俄勒冈绿和羧基萘并荧光素等。与许多其他荧光染料一样,荧光素价格低廉且易于使用,使其成为生物学研究中很受欢迎的染料之一。与大多数其他染料不同,荧光素在水溶液中是无毒的。因此,它是极少数用作地下水示踪剂的染料之一。荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。安徽荧光染料Cy3
三:贴壁细胞染色1、将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。2、从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,但要使表面保持湿润。3、在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。4、37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞比较好培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。5、吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。四:结果检测样品可在培养基中进行检测,可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。上海脂溶荧光染料南京星叶生物提供多种性价比高的各类活化荧光素,例如Cy系列、Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)等。
注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定比较高信号检测时间和信号平台期。保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长。 注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定比较好信号平台期和比较好的检测时间。荧光素钾盐和荧光素钠盐应用上没有差别,两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验。两者功效相同。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
过标记——计算结果显示每摩尔145,000MW的蛋白标记的荧光团大于10mol。虽然过标记的蛋白也可以使用,但可能会引起蛋白的聚集、降低抗体结合抗原的特异性,这些都会造成非特异性结合。过标记还会引起荧光淬灭。可以增加蛋白或减少反应时间。3.未结合染料难以去除——尽管大部分时候用分离柱可以较好的纯化蛋白偶联物,但仍可能会有痕量的游离染料留在偶联物溶液中,会使标记计算的值偏高。可用分离柱再次分离或透析去除。4.蛋白或蛋白偶联物无法洗脱——不要再加缓冲液,只需再次离心一次或几次。罗丹明具有出色的光稳定性以及许多光物理特性,使其非常适合用作激光染料、荧光探针和颜料。
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一种胺活性衍生物的荧光染料,具有广泛的应用,作为抗体和其他探针标记,用荧光显微镜,流式细胞仪、免疫荧光方法如ELISA和Western印迹实验。荧光素衍生物具有高吸收率、优异的荧光量子产率和良好的水溶性,是流式细胞仪和免疫荧光中生物检测**常用的荧光标记之一。**常用的荧光素包括用于标记蛋白质(特别是抗体)的异硫氰酸荧光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于标记肽和寡核苷酸的羧基荧光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于荧光素的染料、底物和偶联物,以及一系列具有针对细胞标记和检测优化的特性的质量iFluor™荧光标记染料。异硫氰酸荧光素(FITC) 是一种有机荧光染料,目前,这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。安徽荧光染料Cy3
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。安徽荧光染料Cy3
光热***是另一个吲哚菁绿的重要应用领域。在光热***中,吲哚菁绿可以被引入**组织,并在近红外激光的照射下吸收光能转化为热能,从而使**组织受到热损伤,达到***的效果。吲哚菁绿的荧光性质使得其在光热***中具有很高的选择性,可以精确地破坏**组织而对正常组织几乎没有影响。这种精细的***方式有助于减少***的副作用,提高***效果。吲哚菁绿在生物识别和药物输送方面也有广泛的应用。在生物识别中,吲哚菁绿可以与特定的生物分子结合,通过检测其荧光信号来实现对这些生物分子的定量分析。这种技术在生物医学研究、药物筛选和疾病诊断中具有重要的意义。另外,吲哚菁绿还可以作为药物输送系统的一部分,将药物包裹在其分子结构中,并通过光***释放药物,实现对疾病靶点的精确***。吲哚菁绿作为一种具有优良绿色溶解度的荧光染料,在医学和生物领域发挥着重要的作用。它的应用领域涉及医学影像学、光热***、生物识别和药物输送等方面,并且具有较高的选择性和精细性。随着科学技术的不断进步,相信吲哚菁绿将在未来更***地应用于临床实践中,为人类的健康和医学科研做出更大的贡献。安徽荧光染料Cy3
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